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基于SYBR Green Ⅰ荧光染料建立鉴定鸟分枝杆菌(Mycobacterium avium,MA)的荧光PCR熔解曲线法,为临床鉴定MA提供简单、准确性高的分子生物学检测方法。 方法:以MA的特异性插入序列IS1311为检测靶标设计引物,在60 ℃的退火温度下,建立鉴定MA的SYBR Green Ⅰ荧光PCR熔解曲线方法,并对MA等21种分枝杆菌标准株和金黄色葡萄球菌等5种常见致病菌进行检测,...
分子预测直肠癌新辅助放化疗后pCR的研究进展
直肠肿瘤 新辅助放化疗 病理完全缓解 分子预测因子
2020/8/27
局部晚期直肠癌(LARC)目前的基本治疗策略是新辅助放化疗(nCRT)和随后的全直肠系膜切除术(TME)。nCRT 后的肿瘤消退在个体间差异显著,病理完全缓解(pCR)是 LARC 的预后因素。明确放化疗反应的预测因素有助于临床医生鉴别可能从多模式治疗中获益的患者,并在早期对其预后进行评估。本文结合近年的相关研究,探讨LARC在新辅助治疗后可能达到pCR的分子预测因子。
评价PCR-SSCP筛检非小细胞肺癌(NSCLC)EGFR基因突变的临床应用潜力。方法:分别采用DNA测序法和PCR-SSCP分析对一定数量的NSCLC标本进行EGFR基因突变检测,以DNA测序结果为金标准,计算PCR-SSCP法的灵敏度、假阴性率、特异度、假阳性率、约登指数、粗符合率、预测值和似然比等指标;同时随机抽取20%的样本,重新进行PCR-SSCP分析,计算两次结果的Kappa指数值。结...
谷胱甘肽S转移酶M1(glutathione S-transferase M1, GSTM1)基因是参与体内多种致癌物代谢的重要的II相代谢酶,其基因多态性被认为与人肺癌遗传易感性有关。本研究旨在探讨天津地区汉族人群GSTM1基因多态性与肺癌遗传易感性之间的关系。方法 采用SYBR green I实时荧光PCR熔解曲线分析方法检测天津地区265例肺癌患者和307例对照者GSTM1基因多态性,应用病...
端粒酶逆转录酶为端粒酶的催化亚单位,其活性与细胞对化疗药物的敏感性密切相关。本实验研究人肺腺癌Anip973/NVB耐药细胞株与亲代细胞Anip973细胞株端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)的mRNA表达及差异,探讨端粒酶与耐药的相关性。方法 采用实时荧光定量RT-PCR法检测人肺腺癌Anip973/NVB耐药细胞与Anip...
分析慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia, CML)患者外周血中高迁移率蛋白A2基因(high mobility group A2,HMGA2)mRNA的表达及其相关临床特征,探讨它们在CML演进中的作用及临床意义。方法:采集2006年1月至2008年2月在南方医科大学南方医院血液科就诊的24例CML和5例健康对照的骨髓和外周血标本(所有参与试验及贡献骨髓和外周血标本的...
Investigation of p53 codon72 polymorphism in oral squamous cell carcinoma (SCC) specimens and normal population by PCR
Squamous cell carcinoma Mouth neoplasm Codon Genotype Exon Polymorphism p53 Polymerase chain reaction
2009/12/7
Background and Aim: A single nucleotide polymorphism at codon 72 of the p53 gene alters the p53 protein structure and affects its activity. This polymorphism depends on geographic regions and race. Al...
错配PCR和DNA改组技术提高抗肝癌单链抗体亲和力
错配PCR DNA改组 肝肿瘤 抗体亲和力
2009/8/26
目的:采用错配PCR和DNA改组技术制备抗肝 癌单链抗体。方法:联合采用错配PCR和DNA改组技术随机突变抗肝癌单 链抗体A4-16重链和轻链可变区,构建抗肝癌噬菌体抗体次级突变库,利用噬菌体展示技术 从中筛选出高亲和力单链抗体突变株。结果:抗肝癌噬菌体抗体次级突 变库容为4.5×107,经过3轮富集筛选和ELISA鉴定获得2株突变株M25、M36,不仅保留原 始克隆的特异性,而且相对亲和力指数分...
喉癌组织中环氧化酶-2(COX-2)基因表达的实时定量PCR研究(英)
环氧化酶-2 喉肿瘤 荧光染料 基因表达
2009/8/25
目的:测定环氧化酶-2(COX-2)mRNA在喉鳞癌组织中的含量,并分析环氧化酶-2(COX-2)mRNA与喉鳞癌临床分期及组织分化程度的关系。 方法: 用序列特异性引物和荧光染料SYBR green Ⅰ聚合酶链式反应(PCR)方法,检测30例原发性喉鳞癌和癌旁组织中COX-2 mRNA表达,采用GAPDH作对照。 结果: 30份标本的扩增产物经熔解曲线分析及DNA琼脂糖凝胶电泳,证实均为COX-...
目的: 探求大肠癌患者早期诊断的外周血分子标记物, 为大肠癌临床筛查提供早期、可靠、简便易行的有效方法.
方法:采用RT-PCR检测28例大肠癌、8例腺瘤中重度不典型增生、18例腺瘤轻度不典型增生、11例炎性息肉患者和10例正常对照者的外周血中CK-20, GST-π,
hTERT, survivin及skp2的mRNA表达情况.
结果:大肠癌、腺瘤中重度不典型增生、腺瘤轻度不典型增生、炎...
应用实时荧光定量RT-PCR法建立肝癌分子诊断指数
实时荧光定量 RT-PCR法 肝癌分子诊断
2009/6/25
目的: 筛选肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中表达水平较正常肝细胞差异大、特异性好的基因, 建立肝癌分子诊断指数, 以期从分子病因学角度实现对肝癌的早期诊断. 方法: 随机选择38例手术切除组织标本, 其中正常肝5例、肝炎4例、肝硬化(LC)12例、HCC和癌旁组织17例, 实时荧光定量RT-PCR检测9个基因的表达, 以管家基因G3PDH为对照, 2-△△C...
目的: 探讨大肠癌组织IL-8 mRNA表达及其临床意义. 方法: 用实时荧光定量PCR检测56例大肠癌组织及癌旁正常组织IL-8 mRNA表达, 分析IL-8 mRNA表达与大肠癌临床病理因素之间的关系. 结果: 癌组织和癌旁正常组织IL-8 mRNA表达有显著差异(1.106±0.420 vs 0.792±0.374, P<0.05). 癌组织IL-8 mRNA表达与淋巴结转移、组织学类型、血...
差别PCR技术及检测卵巢癌C-erb-B2癌基因扩增的研究
差别PCR技术 检测 卵巢癌 C-erb-B2癌基因 扩增
2008/10/21
差别PCR技术及检测卵巢癌C-erb-B2癌基因扩增的研究。
多重PCR 对乳腺癌中MTS1 基因外显子2 缺失的研究
PCR 乳腺癌 MTS1 基因
2008/10/20
为探索MTS1 基因变异在乳腺癌的发生及恶性进程中的作用,作者应用多重PCR 技术对47 例原发性乳腺癌组织进行了检测。结果显示17 例纯合性缺失,变异率为3612 % ,其中淋巴结转移组的变异率60 %(9/ 15) 显著高于未转移组25 %(8/32 , P < 0105) ,浸润性导管癌变异率显著高于其它类型癌。本研究结果提示,MTS1 基因在乳腺癌组织中有变异存在,其变异的频率与肿瘤的恶性...