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RNAi沉默rictor基因表达抑制人膀胱癌T24细胞体内外生长
RNA干扰 Rictor基因 膀胱癌 抑制
2020/1/4
膀胱癌是泌尿系统高发肿瘤，浅表性膀胱癌发展成为浸润性膀胱癌后，预后较差。该研究利用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术沉默rictor基因后，观察其对人膀胱癌T24细胞在体内外生长的影响。方法：构建3个rictor-RNAi表达载体（1＃、2＃和3＃）和1个阴性对照载体。采用瞬时转染和稳定转染技术筛选出干扰效果明显的单克隆稳定细胞株。应用细胞计数试剂盒（cell count...
目的: 探讨RNAi技术体外沉默大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)OPG基因提高RANKL/OPG比例的可行性。方法: 设立空载组(空慢病毒载体转染BMSCs)和OPG沉默组(含OPG基因干扰片段的慢病毒载体转染BMSCs),RT-PCR检测OPG及RANKL的mRNA表达变化,Western blot检测OPG及RANKL的蛋白表达变化。结果: 与空载组比较,OPG沉默组OPG的mRNA和蛋白表...
构建靶向人大肠癌细胞端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase，hTERT）基因的RNAi载体，探讨其对人大肠癌SW480细胞增殖的影响。方法：设计3条靶向hTERT的shRNA序列和阴性对照序列，分别克隆入pGPU6/GFP/Neo载体，构建RNAi载体pGPU6-hTERT-1、2、3和阴性对照载体pGPU6-hTERT-NC，转染SW480 ...
2014年1月，霍华休斯医学研究中心在Science杂志上发表了一篇研究论文（IF: 31.027），该研究小组应用RNAi，发现以前未知的遗传基因缺失与癌变肿瘤的相关性。Schramek D等利用RNAi技术筛选抑制小鼠SCC的基因，发现编码非肌肉肌球蛋白ⅡA的Myh9基因不仅与肿瘤发展密切相关，组织特异性Myh9 RNAi与敲除Myh9基因还可诱发侵袭性SCC。研究人员证实了侵袭性及转移性的S...
研究靶向Hiwi 基因的siRNA对乳腺癌细胞增殖的影响。 方法：将靶向Hiwi基因的siRNA导入乳腺癌细胞，培养并转染MCF-7细胞，运用qRT-PCR、Western-Blot进行干扰效果的检测并使用CCK-8法检测干扰后MCF-7细胞的增殖和凋亡情况。 结果：干扰后48 h和72 h的MCF-7细胞无明显生长抑制作用（P>0.05）,而干扰后24 h的Hiwi-647组细胞的生长抑制作用明...
构建针对PIAS3 的RNAi 质粒载体，初步探讨抑制PIAS3 表达对胶质瘤U251 细胞增殖和凋亡的影响。方法：构建3 个RNAi载体，用脂质体法将其转染胶质瘤细胞系CHG-5，通过半定量RT-PCR 筛选干扰效率最高的重组RNAi质粒。将该RNAi质粒转染体外培养的人胶质瘤U251 细胞株，用半定量RT-PCR 和Westernblot检测PIAS3 的表达。AnnexinV2 FITC和P...
慢病毒介导siRNA沉默结直肠癌SW480细胞内信号转导和转录活化因子3（signal transducer and activators of transcription 3，STAT3）的表达，观察其对SW480细胞凋亡、侵袭、集落形成及下游信号分子Mcl-1、caspase3表达的影响。方法：用携带针对STAT3的siRNA的慢病毒Lenti-STAT3-siRNA感染SW480细胞，R...
RNAi沉默MACC1基因表达抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖和迁移
结肠癌转移相关基因1 小干扰RNA MCF-7 细胞增殖 细胞迁移
2013/11/13
探讨RNAi沉默MACC1基因表达对乳腺癌MCF-7细胞增殖及迁移的影响及相关的分子机制。 方法 化学合成针对MACC1基因的荧光标记的siRNA-FAM，利用 siRNA 转染试剂将MACC1特异性siRNA-FAM转染至乳腺癌MCF-7细胞；采用RT-PCR检测siRNA 对MACC1 mRNA表达的影响，Western blot检测siRNA对MACC1蛋白合成的影响；M...
NEJM发布RNAi治疗重要成果
NEJM RNAi治疗 重要成果
2013/9/25
有如一个有前景的新棒球手还未在大联赛中证实他的实力一样，RNA干扰(RNAi) 这一基因沉默技术一直未能显示它在治疗疾病中潜力。而现在一个RNAi相关成果赢得了研究者们的赞美。一项新研究证实，这种方法可以显著且安全地降低一种罕见肝病致病蛋白的水平。研究结果发表在8月29日的《新英格兰医学杂志》（NEJM）上。
慢病毒介导的HPV16-E7基因RNAi细胞模型的建立
慢病毒 宫颈癌 HPV16 E7基因
2014/3/28
建立HPV16-E7基因的RNAi细胞模型，可为进一步研究HPV16-E7蛋白作用及致癌机制提供物质前提。选择HPV16-E7基因特异的siRNA片段，构建慢病毒siRNA重组表达载体，经293FT病毒包装细胞转染产生重组病毒，并以此感染HPV16阳性SiHa宫颈癌细胞、抗菌素筛选和分子生物学鉴定，建立了稳定表达HPV16-E7-siRNA的RNAi细胞模型。该细胞模型，对目标基因（E7）表达的抑...
建立RNAi抑制柯萨奇病毒腺病毒受体（coxsackievirusandadenovirusreceptor ，CAR ）基因表达的肺鳞状细胞癌NCI-H 520 稳定表达细胞系，将CAR 基因沉默的NCI-H 520 细胞移植于裸鼠体内构建移植瘤模型，观察裸鼠体内成瘤率及对瘤体生长等方面的影响。方法：将针对CARmRNA 序列设计的小干扰RNA重组质粒分别以脂质体转染至NCI-H 520 细胞，...
探讨RNAi沉默酪氨酸激酶受体RON（recepteur d’origine nantais）基因对人结肠癌HT-29细胞侵袭和对抗肿瘤药物敏感性的影响。 方法： 构建RON基因的RNAi慢病毒载体Lv-RON-siRNA。Real-time PCR和Western blotting检测RON基因的沉默效率及RON蛋白表达水平；Transwell侵袭实验和ATP-TCA（ATP-tum...
构建PAK4基因RNAi慢病毒载体，并对其在涎腺腺样囊性癌细胞株SACC-83细胞中干扰效率进行鉴定。方法：针对PAK4基因RNAi有效靶序列，合成Oligo DNA，退火形成双链DNA，与经AgeⅠ和EcoRⅠ 酶切后的pGCsil-GFP载体连接产生shPAK4i-LV慢病毒载体，PCR筛选阳性克隆，测序鉴定。用shPAK4i-LV载体、pHelper1.0载体和pHelper 2.0质粒共转...
RNAi对成牙本质细胞表达TRAF6干涉作用
肿瘤坏死因子受体相关因子6 MDPC-23细胞
2014/8/5
采用针对小鼠肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)的siRNA真核表达载体,探讨其对小鼠成牙本质细胞样细胞MDPC-23中表达TRAF6的干涉作用。方法 将构建成功的2个针对TRAF6基因的siRNA真核表达载体(pSUPER-T和pSUPER-2T),通过脂质体介导瞬时转染MDPC-23细胞,RT-RCR和Western blot法检测其对转染后细胞中TRAF6的mRNA和蛋白表达干涉效果。结...