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探讨JAZF1(juxtaposed with another zinc finger gene 1)基因对3T3-L1脂肪细胞蛋白激酶B(Akt)和AMP活化的蛋白激酶(AMPK)信号通路的影响。方法 构建pGenesil-JAZF1shRNA重组质粒,转染3T3-L1脂肪细胞后分别用胰岛素或利拉鲁肽处理细胞。2-脱氧-3H-D-葡萄糖掺入法检测细胞的葡萄糖摄取,Western印迹法检测各组细胞...
探讨胰岛素-PI3K/Akt通路在高游离脂肪酸(FFA)所致的β细胞功能紊乱中的作用。方法 INS-1细胞分为对照组(NC组)、棕榈酸组(P组)及棕榈酸+NAC组(P+NAC组),分别用0.2 mmol/L棕榈酸和(或)0.2 mg/ml NAC进行干预,48 h后分别检测以下指标:(1)行胰岛素释放试验,检测INS-1细胞胰岛素分泌功能。(2)测定细胞内硝基酪氨酸含量:评价氧化应激水平。(3)W...
观察胰岛素抵抗(IR)的脂肪细胞中Aktser473磷酸化(p-Akt)水平和与张力蛋白同源10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)蛋白的表达,以及醛固酮和螺内酯处理后上述蛋白表达的变化,从而探讨醛固酮在IR发病机制中的作用。方法 通过地塞米松与胰岛素共同诱导3T3L1前脂肪细胞建立IR模型,western blots方法检测正常分化及IR的脂肪细胞PTEN蛋白和p-Akt水平,观察醛固酮和...

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